急性吸人小于2.9mg/m3SO2可产生轻微的呼吸道症状，引起细支气管的微弱改变，包括细支气管的收缩及正常人和哮喘病人的呼吸道气流的改变。

在甜橙中，平均回收率为 60%~115%，RSD 为 0.40%~14%。在柚子中，平均回收率为63%~106%，RSD为0.30%~13%。

由此可见，75 种农药残留的响应值普遍显著增强，这与柑橘复杂基质和仪器类型均有关，基质中除目标化合物以外的其他成分在 GC-MS/MS 上对目标化合物的响应值一般都具有增强效应，但柠檬与温州蜜柑中的三氯杀螨醇和甲基谷硫磷，柠檬中的抗蚜威、硫环磷和联苯肼酯以及甜橙中的异狄氏剂醛表现出较强的基质抑制效应，这可能是因为非目标化合物影响了待测化合物的气化或者离子碎片化的效率，以及部分化合物由于进样口温度过高易被分解，如异狄氏剂醛。在柠檬中，平均回收率为 63%~118%，RSD为1.0%~16%。2.6 实际样品检测为了验证该方法的实际应用能力，抽取了柑橘主产地 95 个柑橘样品，采用所建立的方法进行检测。在柚子中，Me 为 0.97~22.7。在柠檬中，Me 为 0.01~24.54。

检出限（LOD）为 3 倍信噪比时的浓度，定量限（LOQ）为 10 倍信噪比时的浓度。结果表明，本方法简单、快速、准确、灵敏度高、重现性良好，与现有的文献和国家标准相比，无需第 2 次离心，检测成本较低（约 5 元/样品），避免使用大量有机溶剂，减少了对环境的污染，因此可作为大量多种柑橘鲜果样品中多种农药残留的筛选和确证方法。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。

4、酪蛋白肽组分的锌螯合能力分离得到4组酪蛋白肽组分的锌螯合能力如图3所示。从表中可以看出，在胃消化阶段，F1组分中锌离子的解离率最低为5.35％。本研究结论是：酪蛋白肽组分的电势与其螯合锌离子的能力成反比，电势越低，螯合锌离子的能力越强，在胃肠消化过程中，由较低电势的肽形成的肽-锌螯合物具有更高的消化稳定性，锌离子的解离率较低。5、肽-锌螯合物的胃肠稳定性及锌的解离率将肽一锌螯合物在pH2.0，37℃条件下经胃蛋白酶消化2h，结果发现锌离子在消化过程中会不同程度的从螯合物中释放出来(表2)。

F3和F4组分中锌离子解离率相对较高，分别为10.58％和12.33％。而在随后的Caco-2细胞吸收过程中，过高和过低的电势都会影响肽-锌螯合物的吸收。

这一结果说明有相当一部分锌离子是通过肽-锌螯合物的形式进行吸收，且吸收率不同，从而导致4组螯合物中锌的生物利用率不同。本研究中电势较低的F1和F2组分在胃肠消化过程中锌离子解离率比电势较高的F3和F4组分低，说明肽的表面负电荷有利于肽-锌螯合物在胃肠消化过程中的稳定性。从图4可以看出，4组螯合物经吸收后，游离锌的含量之间并没有显著差异，均在6％～8％之间，因此，F2和F3组分中以螯合物形式吸收的锌含量最多，分别为29.8％和21.4％。6、肽-锌螯合物中锌的生物利用率经过胃肠消化后的肽-锌螯合物在Caco-2细胞模型上模拟肠吸收，4组肽-锌螯合物中锌离子的生物利用率如图4所示。

肽组分的电势与其锌螯合能力呈现较强的负相关关系，电势越低越容易将锌离子聚集在其带负电荷的表面。本研究的结果可以为开发高效补锌剂提供理论依据，具有一定的现实意义这一结果进一步说明肽组分中酸性氨基酸的含量对其螯合锌的能力有重要影响。这一结果说明有相当一部分锌离子是通过肽-锌螯合物的形式进行吸收，且吸收率不同，从而导致4组螯合物中锌的生物利用率不同。

6、肽-锌螯合物中锌的生物利用率经过胃肠消化后的肽-锌螯合物在Caco-2细胞模型上模拟肠吸收，4组肽-锌螯合物中锌离子的生物利用率如图4所示。其次为F2组分，为8.77％。

在胃消化阶段，螯合物的稳定性好，则锌离子不易被植酸结合。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系相关链接：酪蛋白，胃蛋白酶，氨基酸，锌。

F3和F4组分螯合锌的能力相对较低，分别为18.97％和16.77％(P＞0.05)。声明：本文所用图片、文字来源《中国食品添加剂》，版权归原作者所有。F3和F4组分中锌离子解离率相对较高，分别为10.58％和12.33％。本研究结论是：酪蛋白肽组分的电势与其螯合锌离子的能力成反比，电势越低，螯合锌离子的能力越强，在胃肠消化过程中，由较低电势的肽形成的肽-锌螯合物具有更高的消化稳定性，锌离子的解离率较低。肽组分的电势与其锌螯合能力呈现较强的负相关关系，电势越低越容易将锌离子聚集在其带负电荷的表面。由于静电相互作用，电势在肽与锌螯合过程中起着至关重要的作用。

在肠阶段锌离子的解离则有助于其吸收。本研究的结果可以为开发高效补锌剂提供理论依据，具有一定的现实意义。

5、肽-锌螯合物的胃肠稳定性及锌的解离率将肽一锌螯合物在pH2.0，37℃条件下经胃蛋白酶消化2h，结果发现锌离子在消化过程中会不同程度的从螯合物中释放出来(表2)。本试验中，F1组分的善电势最低，F4组分孝电势最高，但是两组分中锌的生物利用率反而较低，说明过高或过低的毒电势都不利于肽-锌螯合物中锌的生物利用率。

从表中可以看出，在胃消化阶段，F1组分中锌离子的解离率最低为5.35％。此外，有研究表明，金属离子与肽形成的复合物可以作为一个整体共享肽的吸收转运路径进入细胞和血液循环。

Fl和F2组分表现出较高的锌螯合能力，分别为39.27％和25.90％，两者之间具有显著的差异(P＜0.05)。模拟肠吸收后肽-锌螯合物中锌的生物利用率由两部分组成：一是以游离态吸收的锌，二是以螯合物形式吸收的锌。F1和F4组分较少，分别为8.5％和9.4％。肽-锌螯合物在胃肠阶段的消化稳定性对其吸收尤其重要。

有研究表明，金属离子螯合物在酸性条件下较容易解离。刘艳等人从牡蛎肉中分离得到的含有较多酸性氨基酸的牡蛎肽具有较高的锌螯合能力。

而在随后的Caco-2细胞吸收过程中，过高和过低的电势都会影响肽-锌螯合物的吸收。从图4可以看出，4组螯合物经吸收后，游离锌的含量之间并没有显著差异，均在6％～8％之间，因此，F2和F3组分中以螯合物形式吸收的锌含量最多，分别为29.8％和21.4％。

本研究中电势较低的F1和F2组分在胃肠消化过程中锌离子解离率比电势较高的F3和F4组分低，说明肽的表面负电荷有利于肽-锌螯合物在胃肠消化过程中的稳定性。虽然胰酶的水解作用促进了锌离子的解离，但是仍然可以看出随着肽组分电势的增加，锌的解离程度逐渐增加。

此外，胃蛋白酶的水解作用也会导致锌离子的释放。Caco-2细胞模型会形成与小肠上皮细胞相似的刷状缘酶系，肽-锌螯合在细胞模型上进行吸收时，首先会受到细胞模型表面刷状缘酶的水解作用，导致螯合物的解离。在肠消化阶段，锌离子大量从螯合物中释放出来。F2组螯合物中锌离子的生物利用率最高，为37.1％，其次为F3组螯合物，为29.5％，F1和F4组螯合物中锌离子的生物利用率最低，在16％左右，且两者之间没有显著差异(P＞0.05)。

F1-F4组分中锌离子的解离率分别为：29.21％、32.09％、36.74％和37.71％。四、结论以经过SephadexC25凝胶柱层析分离获得的酪蛋白肽组分制备肽-锌螯合物，采用体外胃液-肠液-Caco-2细胞的三段式消化吸收模型，研究肽的表面电荷性质对肽-锌螯合物的胃肠消化稳定性和生物利用率的影响。

4、酪蛋白肽组分的锌螯合能力分离得到4组酪蛋白肽组分的锌螯合能力如图3所示3、酪蛋白肽组分的氨基酸组成活性肽的带电性质在宏观上反映了其氨基酸组成的差异。

由于F3和F4组分的洗脱液中含有NaCI，这两组分需要经过脱盐处理。收集足够量的肽组分后，调节pH为7.0，冷冻干燥后在一80℃条件下存放备用。

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